JAK2STAT3信号通路调控细胞自噬水平对胃癌血管生成的影响机制研究

朱冰等JAK2/STAT3信号通路调控细胞自噬水平对胃癌血管生成的影响机制研究第6期·731·

doi：10.3969/.1000-484X.2022.06.017

JAK2/STAT3信号通路调控细胞自噬水平对胃癌血管生成的影响机制研究

①

朱冰管佳佳傅军骆杰

②

（蚌埠医学院第一附属医院胃肠外科，蚌埠233000）

A文章编号1000-484X（2022）06-0731-07中图分类号

［摘

R735.2文献标志码

要］目的：基于酪氨酸蛋白激酶2（JAK2）/信号转导和转录激活因子3（STAT3）信号通路调控细胞自噬水平，观察

其对胃癌血管生成的影响机制。方法：利用HumanProteinAtlas和GEPIA数据库在线分析胃癌组织及正常组织JAK2、STAT3

的表达水平、患者预后生存情况。免疫组化检测正常胃组织、胃癌组织及癌旁组织标本p-JAK2、p-STAT3的表达水平，并分析

p-JAK2、p-STAT3表达水平与患者临床病理参数的关系。利用脂质体转染法将靶向JAK2的miR-375转染至BGC-823细胞并分

为3组，control组、si-mimicNC组、si-JAK2组。采用qRT-PCR检测JAK2、STAT3mRNA表达水平；Westernblot检测p-JAK2、

p-STAT3、微管相关蛋白轻链3（LC3）、酵母自噬相关基因6的哺乳动物同源体（Beclin1）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达水

平；透射电镜观察细胞自噬泡的形成；血管形成实验检测细胞血管生成能力。结果：HumanProteinAtlas和GEPIA在线数据库

显示胃癌组织JAK2、STAT3的表达水平高于正常组织，且JAK2、STAT3表达越高，预后生存期越短（P<0.05）。免疫组化结果显

示胃癌组织p-JAK2、p-STAT3的表达水平明显高于癌旁组织和正常胃组织（P<0.05）。p-JAK2、p-STAT3表达越高，肿瘤越大，

浸润深度越严重，分化程度越低，淋巴结越容易发生转移。细胞实验显示，与control组和si-mimicNC组相比，si-JAK2组细胞

p-JAK2、p-STAT3、VEGF水平明显降低，LC3、Beclin1表达水平、自噬能力明显升高，血管生成能力明显降低（P<0.05）。control

可能通过激活JAK2/STAT3信号通路抑制细胞自噬水平、增加血管生成能力，为调控自噬途径治疗胃癌提供新思路。

［关键词］酪氨酸蛋白激酶2/信号转导和转录激活因子3信号通路；自噬；胃癌；血管生成

组和si-mimicNC组上述差异无统计学意义（P>0.05）。结论：JAK2、STAT3在胃癌组织和细胞中表达量均升高，具有促癌作用，

MechanismofJAK2/STAT3signalpathwayregulatingcellularautophagy

levelsongastriccancerangiogenesis

ZHUBing，GUANJiajia，FUJun，mentofGastrointestinalSurgery，theFirstAffiliatedHospitalof

BengbuMedicalCollege，Bengbu233000，China

scription3（STAT3）signalingpathwaytoregulatecellautophagylevel，toobservetheirmechanismofinfluenceonangiogenesisof

［Abstract］Objective：Basedonthejanusproteintyrosineproteinkinase2（JAK2）/signaltransducerandactivatoroftran‐

s：HumanProteinAtlasandGEPIAdatabaseswereusedtoanalyzetheexpressionlevelsofJAK2andSTAT3in

gastriccancertissuesandnormaltissues，histochemistrywasusedtodetect

theexpressionlevelsofp-JAK2andp-STAT3innormalgastrictissue，gastriccancertissueandadjacenttissuespecimens，andanalyze

si-mimicNCgroup，-PCRwasusedtodetectJAK2andSTAT3mRNAexpressionlevels；Westernblotwas

usedtodetectp-JAK2，p-STAT3，microtubule-associatedproteinlightchain3（LC3），andyeastautophagy-relatedgene6inlactation

Animalhomologs（Beclin1），vascularendothelialgrowthfactor（VEGF）expressionlevels；transmissionelectronmicroscopyto

andGEPIAonlinedatabasesshowedthattheexpressionlevelsofJAK2andSTAT3ingastriccancertissueswerehigherthanthosein

nohistochemistryshowedthattheexpressionlevelsofp-JAK2andp-STAT3ingastriccancertissuesweresignificantlyhigherthan

observetheformationofautophagicvesicles；s：HumanProteinAtlas

normaltissues，andthehighertheexpressionofJAK2andSTAT3，theshortertheprognosticsurvival（P<0.05）.Theresultsofimmu‐

thoseinadjacenttissuesandnormalgastrictissues（P<0.05）.Thehighertheexpressionofp-JAK2andp-STAT3，thelargerthe

tumor，themoreseverethedepthofinvasion，thelowerthedegreeofdifferentiation，andtheeasieritisforlymphnodemetastasisto

perimentsshowedthatcomparedwiththecontrolgroupandthesi-mimicNCgroup，thelevelsofp-JAK2，p-STAT3，and

VEGFinthesi-JAK2groupweresignificantlyreduced，andtheexpressionlevelsofLC3，Beclin1，autophagyandangiogenesiswere

lityofangiogenesiswassignificantlyreduced（P<0.05）.Theabovedifferencebetweenthecontrolgroup

①本文为安徽省高等学校自然科学研究项目（KJ2018A1028）。

②通信作者，E-mail：139****1886@。

作者简介：朱冰，男，博士，副主任医师，主要从事肿瘤微血管生成方面的研究，E-mail：bbmczhubing@。

therelationshipbetweentheexpressionlevelso-375

targetingJAK2wastransfectedintoBGC-823cellsusingliposometransfectionmethodanddividedinto3groups：controlgroup，

andthesi-mimicNCgroupwasnotstatisticallysignificant（P>0.05）.Conclusion：JAK2andSTAT3areelevatedingastriccancer

·732·

中国免疫学杂志2022年第38卷

tissuesandcells，andhavecancer-promotingeffects，whichmayinhibitcellautophagyandincreaseangiogenesisbyactivatingthe

JAK2/STAT3signalingpathway，andprovidenewideasforregulatingautophagypathwaysinthetreatmentofgastriccancer.

cancer；Angiogenesis

［Keywords］Tyrosineproteinkinase2/signaltransducerandactivatoroftranscription3signalingpathway；Autophagy；Gastric

胃癌是常见的消化道恶性肿瘤，其发病率和病

死率位居世界第三，约为10%，严重威胁人类生命

［1］

健康。胃癌细胞的恶性增殖是导致患者死亡的主要

1.1.2仪器与试剂人胃癌细胞株BGC-823（中国

科学院细胞资源库）；靶向JAK2的miR-375

（5´-TGAGACATTAAAGTGAACCGGA-3´）、mimicNC

（上海吉码制药技术有限公司）；JAK2、STAT3引物

原因，但胃癌早期症状不明显，诊断时已进入进展

期。胃癌发病机制尚未明确，目前认为是遗传、环

境及幽门螺杆菌共同作用的结果。肿瘤的发生、发

展过程依赖于血管的生成，新生的血管促进肿瘤的

侵袭和转移。在血管生成过程中，需要多种细胞因

子共同调节，

growth

合，促进血管新生，

factor，

血管内皮生长因子

VEGF）

从而抑制

可以与其受体

（vascular

VEGF

VEGF

endothelial

表达，

受体

可能是抗

-2结

肿瘤血管生成的重要策略

［2-3］

。现已证实生长因子

及其所携带的刺激信号通过JAK2/STAT3信号通路

传入细胞核，使血管内皮细胞发生增殖、分化和凋

亡，从而调控肿瘤的发生发展

［4-5］

。JAK2/STAT3信

号通路作用非常广泛，在调控氧化应激、细胞自噬、

炎

JAK2/STAT3

症反应及

信号通路通过调控细胞自噬水平在心

肿瘤等方面均发挥重要作用。目前

肌缺血再灌注损伤、恶性黑素瘤、肺癌以及大肠癌

等方面起保护作用，但在胃癌方面的作用鲜有

报道

［6-9］

。

本研究旨在通过JAK2/STAT3信号通路调控细

胞自噬水平，观察对胃癌血管生成的影响机制，为

今后临床治疗胃癌提供理论和实验依据。

1资料与方法

1.1资料

1.

2019

1.1

及手术切除的胃癌组织标本

年1

一般资料

月至12月期间

收集蚌埠医学院第一附属医院

80例胃癌患者的病历资料

（含对应癌旁组织标

本，距肿瘤边缘≥5cm）。采集的标本保存于液氮。

一般临床资料包括患者年龄、性别、吸烟史、饮酒

史、肿瘤直径、肿瘤位置、病理分级、淋巴结转移、浸

润深度、分化程度等临床信息。纳入标准：①经胃

镜和病理检查诊断为胃癌；②无重大疾病或传染

病。排除标准：①癌旁组织有明显的炎症细胞浸

润；②胃溃疡、胃糜烂者；③其他恶性肿瘤者；④妊娠

或哺乳女性。另外选取30例胃镜及病理检查健康者

为对照组。所有患者均签署知情同意书，本研究已

获得蚌埠医学院第一附属医院伦理委员会批准。

p

Signal

-STAT3

海生

Technology

、

工

LC3

生

、

物

Beclin1

工程有

公司）

、VEGF

限公

；Trizol

单克隆抗体

司）；兔抗人

RNA提取

（美国

p-JAK2

试剂

Cell

、

Lipofectamine

TM

盒、

生物技术有限公司）

3000脂质体、

；免疫组化

反转录试剂盒

S-P试剂盒

（大连宝

（上海碧

云天生物技术有限公司）；BCA蛋白测定试剂盒（南

京凯基生物技术有限公司）；胎牛血清、RPMI1640

培养基、胰蛋白酶（美国Gibco公司）；DYCZ425D型

双垂直电泳仪（北京六一仪器厂）；二氧化碳培养箱

美国Thermo公司）；IX51倒置显微镜（日本Olimpus

公司）。

1.2方法

1.2.1细胞转染及分组将BGC-823细胞接种于

含10%胎牛血清的RPMI1640培养基中培养，当细胞

融合达到80%时胰酶消化传代。以1×10

5

个/孔的密

度将细胞接种于6孔板，采用Lipofectamine

TM

靶向JAK2的miR-375和mimicNC转染细胞并常规

3000将

培养。细胞分为

mimic

miR

NC的阴性

3组：

对照

空白对照组

组（

（control组）；转染

1.

-375的干扰组（si-JAK2组

si

）

-mimic-NC组）、转染

Atlas

2.2在线生物数据库分析

。

使用HumanProtein

析JAK2

数据库

、STAT3

（https

在人体各组织和器官中的表达情况

：///）在线分

以及在正常胃组织和胃癌组织中的表达水平，

GEPIA

JAK2

数据库（http：///）

使用

1.2.3

、STAT3

免疫组化检测胃癌患者

表达水平对患者预后生存期的影响。

分析

p-JAK2、p-STAT3蛋

白表达水平取患者冻存的组织，经固定、包埋等

步骤制作成3µm石蜡切片。经60℃熔蜡、二甲苯

脱蜡、梯度乙醇脱水、高压抗原修复后，分别滴加一

抗p-JAK2（1∶200）、p-STAT3（1∶200）孵育过夜，二抗

孵育20min，DAB显色液显

色，苏木精复染，乙醇梯度脱水、透明、封片，镜检

×200）。染色结果判定：随机选取5个视野，根据染

色面积及强度进行评分。染色面积：

1

0分为<5%，

染色强度：

分为5%~25%

未染色为

，2分为

0

26%~50%

分，淡黄色为

，3分为

1分，

51%~100%

棕黄色为

。

（上

（

（辣根过氧化物酶标记）

（

朱冰等JAK2/STAT3信号通路调控细胞自噬水平对胃癌血管生成的影响机制研究第6期

·733·

2

度，

分，

总分

棕褐色为

≥3分为高表达，

3分。染色总分

<3分为低表达。

=染色面积×染色强

1.2.4qRT-PCR检测各组细胞JAK2、STAT3mRNA

表达水平取冻存的胃癌组织，采用Trizol法提取

总RNA。反转录成cDNA进行扩增，GAPDH为内

参。2

−ΔΔCt

计算JAK2、STAT3的相对表达水平。JAK2

正向引物：5´-TCTGTGGGAGATCTGCAGTG-3´，反向

引物：5´-TTTCAGAGCTGTCATCCGTG-3´，STAT3正

向引物：5´-GACCCGCCAACAAATTAAG-3´，反向引

物：5´-TGGTGTCCAGTTTACCACGA-3´。

1.

LC3

2.5Westernblot检测各组细胞p-JAK2、p-STAT3、

组织，

、Beclin1

加入RIPA

、VEGF

裂解液，

蛋白表达水平

超声匀浆提取总蛋白，

取冻存的胃癌

BCA

蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，进行SDS-PAGE电

泳，

2

湿转至PVDF膜，用含

1∶

h，

10

加入一抗

000）室温孵育

（1∶2000

2h

）

，用

4

5%

℃

ECL

孵育过夜

脱脂牛奶

化学发光剂进行显

，

TBST

加入二抗

封闭

影，以GAPDH为内参校正，ImageJ软件进行发光结

果的灰度分析。

1.2.6透射电镜观察各组细胞自噬泡的形成细

胞转染24h后，胰酶消化，以1×10

6

个/孔接种在6孔

板，每孔设3个复孔，培养48h后收集细胞，用4%戊

二醛于4℃固定，然后进行常规电镜的固定、脱水、

包埋，制成超薄切片，H-7500透射电镜下观察各组

细胞的超微结构变化。

1.2.7Matrigel体外成管实验检测细胞的血管生成

能力

96孔培养板，

取50µl/

待

孔新鲜配制的Matrigel基质胶加入

-823

Matrigel

细胞接种于

胶凝固，

96

以

孔板培养

1×10

4

个/ml的密

度将各组BGC48h，每

孔设3个复孔，倒置显微镜（×100）下观察细胞血管

生成情况并记录。

1.3统计学分析数据统计采用SPSS16.0软件，

作图工具采用Graphpad5.0，计数资料采用n（%）表

示，两组间比较采用χ

2

检验，多组间比较采用单因

素方差分析，P<0.05表示差异具有统计学意义。

2结果

2.

Atlas

1在线生物数据库分

在于肺、

数据库

胆囊、

（图

淋巴、

1、图

析结果HumanProtein

扁桃体、

2）显示，

胃等组织和器官中，

JAK2、STAT3广泛存

与

正常组织相比，胃癌组织中JAK2、STAT3表达明显

升

STAT3

高。GEPIA数据库显示，胃癌组织的JAK2、

4A

短（图

），且

表

3B

JAK2

达水平也明显高于正常组织（图3A、图

、图

、

4B

STAT3

），差异具有统计学意义

的表达量越高，患者生存期越

（P<0.05），

说明JAK2、STAT3的表达在胃癌中具有研究意义。

图1人体中以及正常胃组织和胃癌组织中JAK2表达

Fig.1ExpressionsofJAK2inhumans，normalgastric

tissuesandgastriccancertissues

图2人体及正常胃组织和胃癌组织中STAT3表达

Fig.2ExpressionofSTAT3inhumans，normalgastric

tissuesandgastriccancertissues

Note：

GTEx

2

图3

Compared

project

expression

胃癌组织中

with

；B.

ingastrictissuesinTCGAdatabaseand

normal

JAK2

JAK2

tissues

expressionlevelspatient´soverallsurvival.

表达及其对预后的影响

，*.P<0.05.

Fig.3JAK2expressioningastriccancertissuesandits

effectonprognosis

（

·734·

中国免疫学杂志2022年第38卷

2.2免疫组化染色检测p-JAK2、p-STAT3的表达

肿瘤细胞中阳性表达，呈灶状和弥漫状分布。其阳

性表达率显著高于癌旁组织和正常组织。

2.3p-JAK2、p-STAT3的表达与患者临床病理参数

如表1所示，为验证p-JAK2、p-STAT3在胃的关系

免疫组化染色结果显示（图5），p-JAK2、p-STAT3在

癌发生发展过程中的作用，将80例患者按p-JAK2、

Note：3expressioningastrictissuesinTCGAdatabaseand

GTExproject；3expressionlevelspatient´soverallsurvival.

Comparedwithnormaltissues，*.P<0.05.

图5

Fig.5

p-JAK2、p-STAT3在患者正常胃组织、胃癌组织及癌旁

组织中的表达（×200）

Expressionsofp-JAK2andp-STAT3innormal

gastrictissue，gastriccancertissueandadjacent

tissuesofpatients（×200）

图4胃癌组织中STAT3表达及其对预后的影响

STAT3expressioningastriccancertissuesandits

effectonprognosis

Fig.4

表1胃癌组织中p-JAK2、p-STAT3表达水平与患者临床病理参数的关系分析［例（%）］

Analysisofrelationshipbetweenexpressionlevelsofp-JAK2andp-STAT3ingastriccancertissuesandclinical

pathologicalparametersofpatients［n（%）］

Parameter

n

32

48

43

37

66

14

52

28

38

42

43

17

20

36

44

49

31

46

34

51

29

Low（n=32）

10（31.25）

22（68.75）

17（53.13）

15（46.87）

27（84.38）

5（15.62）

20（62.50）

12（37.50）

21（65.63）

11（34.37）

21（65.63）

7（21.87）

4（12.50）

25（78.12）

7（21.88）

14（43.75）

18（56.25）

8（25.00）

24（75.00）

9（28.13）

23（71.87）

p-JAK2expression

High（n=48）

22（45.83）

26（54.17）

26（54.17）

22（45.83）

39（81.25）

9（18.75）

32（66.67）

16（33.33）

17（35.42）

31（64.58）

22（45.83）

10（20.83）

16（33.34）

11（22.92）

37（77.08）

35（72.92）

13（27.08）

38（79.17）

10（20.83）

42（87.50）

6（12.50）

P

0.192

0.927

0.719

0.702

0.008

0.093

Low（n=28）

9（32.14）

19（67.86）

16（57.14）

12（42.86）

21（75.00）

7（25.00）

18（64.29）

10（35.71）

19（67.86）

9（32.14）

18（64.30）

5（17.85）

5（17.85）

18（64.29）

10（35.71）

13（46.43）

15（53.57）

10（35.71）

18（64.29）

9（32.14）

19（67.86）

p-STAT3expression

High（n=52）

23（44.23）

29（55.77）

27（51.92）

25（48.08）

45（86.54）

7（13.46）

34（65.38）

18（34.62）

19（36.54）

33（63.46）

25（48.08）

12（23.08）

15（28.84）

18（34.62）

34（65.38）

36（69.23）

16（30.77）

36（69.23）

16（30.77）

42（80.77）

10（19.23）

P

0.293

0.655

0.195

0.922

0.007

0.367

Tab.1

Age/year

<65

≥65

Gender

Male

Female

Smokinghistory

Yes

No

Drinkinghistory

Yes

No

Tumordiameter/cm

≤5

>5

Tumorlocation

Gastricantrum

Gastricbody

Fundusofstomach/cardia

Pathologicalgrade

PhaseⅠ~Ⅱ

PhaseⅢ~Ⅳ

Lymphnodemetastasis

Yes

No

Infiltrationdepth

Serosallayer

Intheserosallayer

Differentiation

PhaseⅠ~Ⅱ

PhaseⅢ

<0.001

0.009

<0.001

<0.001

0.011

0.046

0.004

<0.001

朱冰等JAK2/STAT3信号通路调控细胞自噬水平对胃癌血管生成的影响机制研究第6期

·735·

Note

图6

：Compared

JAK2、STAT3

withsi-mimic

mRNA

-NC

在各组细胞中的表达

group，*.P<0.05.

Fig.6JAK2，STAT3mRNAexpressionsineachgroupof

cells

Note

图7

：Compared

Western

with

blot

si-mimic

检测

-NC

p-JAK2

group，

、

*.

p-STAT3

P<0.05.

、LC3、Beclin1、

VEGF蛋白表达水平

Fig.7Westernblotdetectionofp-JAK2，p-STAT3，LC3，

Beclin1andVEGFproteinexpressionlevels

p

p

-STAT3相对表达量分为高表达组（p-JAK2：48例；

28

-STAT3：52例）、低表达组（p-JAK2：32例；p

年龄、

例）

性别、

。结果显示，

吸烟史、

p

饮酒史、

-JAK2、

肿瘤位置等无明显相关

p-STAT3的表达水平与

-STAT3：

性（P>0.05），而与肿瘤大小、病理分级、淋巴结转移、

浸润深度、

p-JAK2、p-STAT3

分化程度有明显的相关性

表达越高，肿瘤越大，

（

浸润深度越

P<0.05）。

严重，分化程度越低，淋巴结越容易发生转移。

2.

qRT

4qRT-PCR检测细胞JAK2、STAT3mRNA表达

组相比，

-PCR

si

结果显示

-JAK2组的

（图

JAK2

6），与

、

STAT3

control组和

表达水平明显降

si-mimic-NC

低，

si-mimic

差异具有统计学意义

-NCJAK2、STAT3

（P

表达水平无显著性变化

<0.05），而control组和

P>0.05）。

组

2.

Beclin1

5Western

与control

、VEGF

组和

的表达

blot检测细胞p-JAK2、p-

si-mimic-

Western

NC组相比，

blot结果显示

STAT3

si-JAK2

（

、

组细胞

图

LC3

7）

、

，

图8透射电镜观察各组细胞自噬泡形成（×10000）

Fig.8Transmissionelectronmicroscopeobservationof

formationofautophagicvesiclesineachgroup

（×10000）

Note

图9

：Compared

Matrigel

with

体外成管实验检测细胞的血管生成能力

si-mimic-NCgroup，*.P<0.05.

Fig.9Matrigelinvitrotubeformationexperimentto

detectangiogenesisabilityofcells

中p-JAK2、p-STAT3、VEGF表达水平明显下降，

LC3

义（P

、Beclin1

<0.05），

表达水平明显升高，

而control组和si-mimic

差异均具有统计意

-NC组细胞各蛋

白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。

2.6透射电镜观察各组细胞自噬泡的形成透射

电镜结果显示（图8），control组和si-mimic-NC组细

胞内细胞核、线粒体等结构形态正常，细胞质内几

乎未见自噬体或自噬泡形成；而si-JAK2组出现自

噬体，内含降解成分。

2.7Matrigel体外成管实验检测细胞的血管生成

能力小管形成实验结果显示（图9），与control组

和si-mimic-NC组相比，si-JAK2组细胞小管生成数

量明显下降（P<0.05），而control组和si-mimic-NC组

细胞小管形成数目差异无统计学意义（P>0.05）。

3讨论

胃癌是世界上常见的恶性肿瘤，其发病率位列

第四，致死率位列第二

［10］

。尽管外科手术、化疗、放

疗等治疗手段快速发展，但由于胃癌缺乏特异性症

（

·736·

状易错过最佳治疗时间和癌细胞的转移性等，使得

胃癌患者五年生存率不到30%

［11］

。因此对胃癌的

早期检测和治疗至关重要。肿瘤的复发和转移是

胃癌细胞及其微环境相互作用的结果，而细胞自噬

和血管生成是适应微环境的适应性反应

［12］

。在此

过程中JAK2/STAT3信号通路参与其中，JAK2/

STAT3

应及肿瘤等方面均发挥重要作用。岳彩飞等

信号通路在调控氧化应激、细胞自噬、炎症反

[13]

发现

褪黑素可抑制PDGF诱导的HSC-T6的活化与增殖,

其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。

齐丽娜等

［14］

发现JAK2/STAT3信号通路影响猪卵巢

黄体的形成与退化。王丹丹

［15］

发现柔红霉素通过

JAK2/STAT3

细胞肥大。本研究将靶向

信号通路影响细胞自噬途径诱导心肌

JAK2的miR-375转染至

对胃癌细胞自噬水平及血管生成的影响。

BGC-823细胞，通过阻断JAK2/STAT3信号通路观察

JAK2

JAK2

形成二聚体并进入细胞核，

能够诱导反向

是一种非

STAT3

受体

的磷酸化，

型酪氨酸

进而调控反向靶基因的

游离的

激酶，

p

活

-STAT3

化的

表达

［16］

。在恶性肿瘤中，持续的生长信号导致

STAT3

p

正常胃组织，

-JAK2

处于持续活化状态。本研究显示胃癌组织

、p-STAT3

p-JAK2

的表达水平明显高于癌旁组织和

、p-STAT3表达越高，肿瘤越大，

浸润深度越严重，分化程度越低，淋巴结越容易发

生转移。当转染BGC-823细胞后，与control组和

si

表达明显降低。同时

-mimicNC组相比，si-JAK2

Human

组细胞

Protein

p-JAK2

Atlas

、

和

p-STAT3

GEPIA

在线数据库也显示胃癌组织JAK2、STAT3的表达水

平高于正常组织，且JAK2、STAT3表达越高，预后生

存期越短（P<0.05）。提示JAK2/STAT3信号通路在

胃癌中发挥促癌作用。与朱秀敏

［17］

发现SIRT6通过

抑制JAK2/STAT3信号通路抑制胃癌生长结果

一致。

细胞自噬是生物体内高度保守的代谢途径，能

够吞噬细胞内受损、衰老以及失去功能的蛋白质，

形成自噬泡被溶酶体水解。自噬过程需要多个自

噬调节蛋白参与。Beclin-1基因（也称BECN1基

因），与自噬相关基因ATG6/vps30同源，可以诱导其

他自噬相关蛋白定位于自噬泡上，是诱导细胞发生

自噬的关键基因，可抑制肿瘤的形成与生长。

王颖

［18］

发现胃癌组织中Beclin-1表达量明显低于癌

旁组织，在淋巴结转移患者中表达量低于淋巴结未

中国免疫学杂志2022年第38卷

转移患者。武冰洁等

［19］

发现胃癌细胞中Beclin-1阳

性表达率低于非胃癌组织，Ⅲ、Ⅳ期的表达率低于

Ⅰ

相比，

、Ⅱ期。本研究发现与

si-JAK2组细胞Beclin

control

-1表达明显升高。提示

组和si-mimicNC组

Beclin

起调控作用。

-1低表达与胃癌关系密切，

LC3是自噬体膜蛋白，

且对胃癌的进展

可作为检测自

噬活动的标志物，没有自噬发生时，以LC3-Ⅰ形式

存在，当发生自噬后，LC3-Ⅰ经泛素化修饰形成

LC3

平检测自噬情况。宋华勇等

-Ⅱ，从而启动自噬。因此常用

［20］

和罗小月等

LC3或LC3

［21

-

］

Ⅱ

研究

水

发现胃癌组织中LC3阳性表达率明显低于癌旁组

织，且与胃癌发展程度相关。本研究发现与control

组和si-mimicNC组相比，si-JAK2组细胞LC3表达

明显升高，提示LC3与胃癌发展程度相关。本研究

透射电镜观察到control组和si-mimic-NC组细胞内

几乎未见自噬体或自噬泡形成；而si-JAK2组细胞

出现自噬体。提示JAK2/STAT3信号通路的阻断促

进了细胞自噬水平。

肿瘤的生长和发展伴随着大量微血管的生成，

新生血管不仅为肿瘤细胞输送营养、排泄代谢废

物，而且还能促进其转移。VEGF能够促进肿瘤微

血管形成，是促进血管生长因子里面作用最强的，

当与VEGFR1和VEGFR2受体结合后，能使血管迅

速生长。本研究发现与control组和si-mimicNC组

相比，si-JAK2组细胞VEGF表达、小管生成数量明

显下降，与董峰等

［22］

研究结果一致。

综上所述，本研究探讨JAK2、STAT3在胃癌中

的表达及临床意义，证实了JAK2、STAT3在胃癌中

高表达且发挥促癌作用，并且与胃癌患者的不良预

后紧密相关，其可能是JAK2/STAT3信号通路抑制

了细胞自噬且增加了血管形成能力，对胃癌患者的

预后具有指导意义。

参考文献：

1］李炜伟，唐岱，王振冉.胃癌侵袭转移机制的研究现状及

进展［J］.当代医学，2018，24（36）：：10.3969/

2］DENG

.

X

1009

P，

-

LI

4393.

ZL

2018.

，XIONG

36.088.

RD，-7inhibitsMGC-803

［

cells

J］.Biomed

growthin

Pharmacother

vitroandin

，2019

vivo

，

via

109

down

（8）

-

：

regulating

1659-1669.

glycolysis

DOI：

3］SOROKIN

10.1016/j.

M

biopha.

，PODDUBSKAYA

2018.11.001.

E，BARANOVAM，

sequencing

toramucirumab

profiles

ingastric

anddiagnostic

cancer［J

signatures

］.ColdSpring

linked

Harb

with

Mol

response

Case

［

［

［

朱冰等JAK2/STAT3信号通路调控细胞自噬水平对胃癌血管生成的影响机制研究第6期

·737·

［4］张志鑫，李彦杰，秦合伟，等.基于PI3K/Akt/mTOR信号通路

调控巨噬细胞自噬探讨黄芪甲苷抗动脉粥样硬化的作用机制

［J］.中草药，2017，48（17）：：10.7501/.

［5］邓士兵，夏

0253-2670.2017.17.019.

豪，周忠泉.姜黄素通过调控JAK2/STAT3信号

Stud，2020，6（2）：：10.1101/mcs.a004945.

细胞中JAK2/STAT3信号通路的影响［J］.中国药理学通报，

［14］齐丽娜，蒋静乐，魏全伟，等.细胞自噬相关信号通路分子

在猪卵巢黄体形成与退化过程中的表达［J］.中国兽医学

报，2019，39（1）：：10.16303/.1005-

［15］王丹丹.JAK2/STAT3信号通路及自噬在柔红霉素诱导心肌

细胞肥大中的作用［D］.郑州：河南大学，2017.

［16］李孝全，莫静欣.中药大黄对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠肺

泡巨噬细胞凋亡的影响［J］.中国免疫学杂志，2020，36（15）：

［17］朱秀敏.SIRT6通过抑制JAK2/STAT3信号通路抑制胃癌生

长［J］.基因组学与应用生物学，2019，38（11）：5215-5220.

［18］王

DOI：10.13417/.038.005215.

颖.胃癌组织中Beclin1和LC3的表达水平分析［J］.中

：10.3969/.1000-484X.2020.15.010.

4545.2019.01.26.

2020，36（3）：403-407.

通路对高糖环境下心肌细胞生物学特性的影响［J］.中国老年

学杂志，2017，37（22）：：10.3969/.1005-

［6］孙

9202.2017.22.003.

涛，郭志华，李雅，等.益心泰对心肌缺血再灌注损伤

大鼠JAK2/STAT3信号通路相关因子的影响［J/OL］.中国中医

药信息杂志，2021，28（2）：：10.19879/.1005-

［7］余

5304.202006405.

扬.JAK2信号通路介导人恶性黑素瘤A375细胞的自噬

和凋亡机制研究［J］.中国美容医学，2020，29（4）：98-101.

［8］刘贵廷，杨

DOI：10.15909/61-1347/r.003539.

柳.SOX9基因下调JAK2/STAT3信号诱导肺癌

国实用医药，2020，15（12）：：10.14163/.

［19］武冰洁，李晓丽.自噬相关蛋白Beclin-1在胃癌患者中表达

意义的meta分析［J］.中国普外基础与临床杂志，2019，26

（3）：：10.7507/1007-9424.201811052.

［20］宋华勇，马磊.自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白轻

链3在胃癌组织中的表达及临床意义［J］.泰山医学院学报，

2017，38（7）：：10.3969/.1004-7115.2017.

［21］罗小月，严

07.004.

倩，彭美玲，等.Beclin1和LC3在胃癌组织中

11-5547/r.2020.12.087.

细胞凋亡及降低免疫逃逸相关因子表达的研究［J］.中国免疫

学杂志，2019，35（1）：：10.3969/.1000-

［9］张斌忠，何春华.大肠癌中自噬相关蛋白与JAK2/STAT3信号

通路的相关性［J］.中国现代医学杂志，2019，29（22）：28-

［10］王

：10.3969/.1005-8982.2019.22.006.

攀，徐高生，马蔚，等.环状RNA在胃癌中的研究现

484X.2019.01.012.

状与策略［J］.生物化学与生物物理进展，2019，46（3）：238-

［11］JOHA，KIMJY，YANGSH，eoflocalIL6/

JAK2/STAT3signalinginhighglucose-inducedpodocytehyper‐

trophy［J］.KidneyResClinPract，2016，35（4）：212-218.

DOI：10.1016/.2016.09.003.

：10.16476/.2018.0216.

的表达水平和临床意义［J］.湖南师范大学学报（医学版），

［22］董

2016，13（4）：4-7.

峰，牛跃平，郑英斌，等.水通道蛋白1、血管内皮生长

因子及微血管密度在胃癌组织中的表达及临床意义［J］.中

国现代医学杂志，2019，29（3）：：10.3969/j.

issn.1005-8982.2019.03.007.

［12］吴景华，郭佳培，王志刚，等.IL-6-JAK2/STAT3信号途径在

骨质疏松症的作用机制研究［J］.现代预防医学，2016，43

（14）：2621-2623.

［13］岳彩飞，洪汝涛，徐德祥，等.褪黑素对PDGF诱导的肝星状

［收稿2021‐04‐09修回2021‐09‐13］

（编辑苗磊）

欢迎订阅和投稿《中国免疫学杂志》