王锦蛇(Elaphe carinata)Sox基因保守区的克隆及测序

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第３１卷１期　

２００８年１月　

安徽师范大学学报（自然科学版）　

ｅｎｃｅ）Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｎｈｕｉ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉ　Ｖｌ０１．３１　Ｎｏ．１　

Ｊａｎ．２　０　０　８　

王锦蛇（Ｅｌａｐｈｅ　ｃａｒｉｎａｔａ）Ｓｏｘ基因保守区的克隆及测序　

杨超　，杨传秀２　

２４１００１）　（１．安徽师范大学生命科学学院，安徽芜湖２４１０００　２．皖南医学院生理教研室，安徽芜湖

摘要：参照人ＳＲｙ基因ＨＭＧ—ｂｏｘ保守区序列设计一对兼并引物，ＰＣＲ扩增了王锦蛇的Ｓｏｘ　

基因，采用ＳＳＣＰ技术筛选阳性克隆，并对其进行了测序．结果在雌雄个体中共筛选出４个Ｓｏｘ基　

因，其中一个为雌性独有，显示出性别差异性；４个Ｓｏｘ基因ＤＮＡ序列及编码的氨基酸序列与人相　

应ＳｏＸ基因的相似性分别为９１％、９１％、９２％、９１％和９６％、９８％、９６％、９６％，显示出高度的保守　

性．实验结果为王锦蛇的性别决定机制研究提供了分子资料．　

关键词：王锦蛇；Ｓｏｘ基因；ＰＣＲ；测序　

中图分类号：Ｑ３４３　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１—２４４３（２００８）０１—００５３—０４　

Ｓｏｚ家族是一类由ＳＲＹ相关基因构成的基因家族．所有该家族成员的共同特点是其编码的蛋白质含　

有ＨＭＧ—ｂｏｘ结构域…，因而认为其编码的蛋白质是一类重要的转录调控因子－２　Ｊ．Ｓｏｘ基因在个体发育过　

程中有极其重要的作用，已知Ｓｏｚ　１、Ｓｏｚ　２、Ｓｏｘ　３、Ｓｏｚ　５、Ｓｏｚ　６、Ｓｏｘ　９、Ｓｏｘ　１７参与性别决定与分化－３　；　

Ｓｏｚ　１、Ｓｏｘ　２、Ｓｏｚ　３、Ｓｏｘ　４、Ｓｏｚ　ｌ１、Ｓｏｚ　２２、Ｓｏｚ　３０参与中枢神经系统发育　咱　；Ｓｏｚ　２、Ｓｏｚ　７、Ｓｏｘ　１０、Ｓｏｘ　

１１等在胚胎早期发育中担负重要功能【　；Ｓｏｘ　１０、Ｓｏｘ　１１、Ｓｏｚ　１９在外周神经系统中表达【　Ｉ８　；Ｓｏｘ　１、Ｓｏ．ｒ　

２、Ｓｏｚ　３与眼球的晶状体发育有关【５，９　；Ｓｏｚ　４、Ｓｏｚ　６与体细胞的分化有关【ｌ０　；Ｓｏｚ　９、Ｓｏｘ　１０与软骨的形成　

有关…Ｊ．近期的研究又发现，Ｓｏ：ｃ　６和Ｓｏｘ　９蛋白还直接参与了前体ｍＲＮＡ的剪接作用【ｌ２　Ｊ．近年来新的技术　

和方法的使用使得对５如基因的研究有了长足的进展，不仅发现了更多的Ｓｏｚ基因家族成员，也对其在器官　

形成和个体发育过程中的作用进行了详尽的分析【１３－１４］．因此Ｓ　基因的研究对探讨动物的性别决定分子　

机制，胚胎发育的分子机制等都有极其重要的理论意义；同时对实现动物性别决定的人工控制，器官发育异　

常的分子诊断和基因治疗也有重要的实践指导意义．　

与哺乳动物相比，爬行动物性别决定机制非常复杂，有ＧＳＤ和ＥＳＤ等多种类型，它们是研究人类和高　

等动物性别决定机制的良好模式生物【１５］．王锦蛇隶属蛇亚目，游蛇科，是分布广泛的无毒蛇，有关其核型的　

研究已有报道，而性别决定分子机制的研究，尚未见报道，本文采用ＰＣＲ技术，对王锦蛇的Ｓｏｘ基因进行了　

克隆、测序，旨在阐明其性别决定与分化的分子机制，进而为研究Ｓｏｘ基因的进化提供分子资料．　

１材料和方法　

１．１实验动物　

王锦蛇３雌３雄，２００３年９月购于安徽芜湖市吉和街市场，性别按活体解剖检查确定，均为性成熟个体．　

１．２试剂　

实验用蛋白酶Ｋ、ＭｇＣＩ２、ｄＮＴＰ、Ｔａｑ　ＤＮＡ聚合酶、１００ｂｐ　ＤＮＡ　ｌａｄｄｅｒ等均购于上海生物工程公司．　

１．３组织ＤＮＡ的提取　

参照文献进行（金冬雁等，１９９６）［　］，１％琼脂糖凝胶电泳检测，４Ｃ保存备用．　

１．４引物设计及ＰＣＲ扩增　

引物参照人ＳＲＹ基因ＨＭＧ—ｂｏｘ保守区序列及有关文献设计【＂］，上海生物工程公司合成，ＰＡＧＥ纯　

化．Ｐｌ：５’ＡＡＧＣＧＡＣＣＣＡＴＧＡＡ（Ｃ＼Ｔ）ＧＣ（Ａ＼Ｇ＼Ｃ＼Ｔ）ＴＴ（Ｃ＼Ｔ）ＡＴ（Ｇ＼Ａ＼Ｃ＼Ｔ）Ｇ３’，Ｐ２：５’　

ＡＣＧＡＧＧＴＣＧＡＴＡ（Ｃ＼Ｔ）ＴＴ（Ａ＼Ｇ）ＴＡ（Ａ＼Ｇ）Ｔ（Ｃ＼Ｔ）（Ｇ＼Ａ＼Ｔ＼Ｃ）ＧＧ３’，该对引物可特异扩增人　

收稿日期：２００７—０３—１２　

＼　

基金项目：安徽省自然科学基金（０７０４１３１４０）；安徽省教委自然科学基金（２００３ｋｊ１６４）　

作者简介：杨超（１９７０一），男，安徽泗县人，副教授，博士研究生．　

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安徽师范大学学报（自然科学版）　２００８焦　

ＳＲＹ基因ＨＭＧ—ｂｏｘ的保守序列，片段长为２１６ｂｐ．　

反应体系：１００ｎｇＤＮＡ、１．５ｍＭ　Ｍｇ　、９０ｕＭｄＮＴＰ、０．３　Ｍ／每引物、１ＵＴａｑ聚合酶，加ｄｄＨ２０补至２５ｔ￣１；　

一一一

●４　

ｕ　

循环条件为：９７℃预变性５ｍｉｎ，９４℃５０ｓ，５５℃５０ｓ，７２℃５０ｓ，３５个循环，７２℃延伸１５ｍｉｎ，４℃保存．１．７％琼　

脂糖凝胶电泳检测并拍照．余下的ＰＣＲ产物用纯化试剂盒进行纯化．　

１．５　ＰＣＲ产物的克隆　

取纯化后王锦蛇雌雄个体＆　基因的ＰＣＲ产物分别克隆；连接反应及转化按ｐＧＥＭ　

—

Ｔ载体试剂盒的说明书进行；不同阳性克隆筛选采用菌落ＰＣＲ和ＳＳＣＰ方法［１８］．　

１．６测序及Ｓｏｘ基因的分析　

对经菌落ＰＣＲ和ＳＳＣＰ分析筛选出的不同阳性克隆，委托北京赛百盛生物技术公司　

进行全自动测序，并推测编码的氨基酸序列；采用Ｂｌａｓｔ方法，联机与ＧｅｎＢａｎｋ进行ＤＮＡ　

及氨基酸序列相似性检索．由此命名王锦蛇Ｓｏｘ基因（ＳｏｘｏｆＥｌａｐｈｅ　ｃａｒｉｎａｔａ，简写为ＥＣ　

Ｓｏｘ）．　

图１王锦蛇Ｓｍ：基　

２　结　果　

因ＰＣＲ扩增结果　

Ｍ：１００ｂｐＤＮＡ　ｌａｄｄｅｒ；　

２．１扩增结果　

１：雄王锦蛇；２：雌王　

雌、雄蛇均扩出一条带，实验重复三次，均得到一致结果，且扩增出的带型一致，大小　

锦蛇；３：阴性对照；４：　

均为２２０ｂｐ左右，与阳性对照一致（图１）．此结果初步说明了王锦蛇基因组中存在有人的　

阳性对照　

ＳＲＹ基因的同源基因．　

Ｆｉｇ　１　Ａｇａｒｏ￣ｇｅｌ　

２．２王锦蛇Ｓｏｘ基因序列　ｄ叫　叫托　

经菌落ＰＣＲ￣Ｉ　ＳＳＣＰ￣，从４６０个阳性克隆中筛选到４个与人ｓＲｙ基因单链泳　”　

ｒＩ１ａｌ。；　

动速率不同的阳性克隆．经序列分析发现４个阳性克隆分别代表不同的Ｓｏｘ基因，根据其２：ｆｅｍａｌ　；３：Ｅｌ　ｈ　

与人ＳＯＸ基因的相似性分别命名为ＥＣＳｏｘｌ、ＥＣＳｏｘ４、ＥＣＳｏｘ１１、ＥＣＳｏｚ２２．其中，ｃ　ａ旱；４：Ｅｌａｐｈｅ　

ＥＣＳｏｘ４为雌蛇独有；ＥＣ．％ｘｌ、ＥＣＳｏｘ１１、ＥＣ．．％ｘ２２为雌雄共有．其ＤＮＡ序列见图２，推测ｃ．ａｒｉｎａｔａ　

编码氨基酸的序列见图３，与人类相应ＳＯＸ和其他物种Ｓｏｘ基因的ＤＮＡ序列同源性（表１）；与人类相应　

ＳＯＸ基因编码氨基酸及其他物种Ｓｏｘ基因编码氨基酸的一致性（表２）．　

ＥＣＳ缸１　（　ｒＣＴ（×　ｒＣＴＣＡ（ＸＸ　ＣＣＡ（Ｘ）（Ｘ　Ｃ（×；ＡＡ（　Ａ，ｒ（Ｘ研（：Ａ（Ｘ　ＡＧＡＡＣＦＣＣＡＡＧＡＴＧＣＡＣＡＡＣＴＣＧ　

目　ｒ４　Ｇ　瞄　（二４（　Ｇ０矧Ｃ　ｚ４４（　矧　Ｇ　—　戏　４　（　ＣＬＸ２Ｇ　

ＥＣＳ　１　１　（　Ｘ　℃ＴＣＡ（；ＡＴｃ（　ＡＧＣＧＧＡＧＧＡＡＧＡＴｃＡＴＧＧＡ（　Ａ（汀ＣＣＩ；ＣＡＸ；ＡＣＡＴＧＣＡＣＡＡＣＧＣＧ　

ＥＣＳ　２２　（　ＴＧＴＧ（　℃ＣＣＡＧＡＡＣＧＡＡ　Ｘ姒×　ＡＡＧＡＴＣＡＴＧＧＡＣＣＡＧＴ￣ＡＣＡＴＧＣＡＣＡＡＣＧＣＣ　

＊＊＊＊＊＊＊＊　＊＊＊　＊　＊　＊＊＊　＊＊＊＊＊＊＊　＊　＊＊　＊＊　＊　＊＊＊＊＊＊＊＊＊　＊　

Ｇ　￡　ｎ　ＣＣＧ　ｃ｝　ｋ　ＣＧ　ＣＣ　

ＧＡＧＡＴ（　℃ＣＡＡ　

（；Ｃ（　３Ｔ（×　ＡＡ（　Ｘ：　ＡＡ（×；ＡＴＡ（　３（；ＡＣＡＡ（　ＡＴＣＣＣＴ　

（　（　ｎ　．４　ＡＡＧＣｒ（　℃ＡＡＧＧＡＴＡＧＣＧＡＣＡＡ（　ＡＴＣＣ（　ｒ　

（　ＡＡＡ１－（　Ｉ’ｃＣＡＡＧＣ（×　ＸＸ　ＡＣＧＧＣ（　Ｘ　Ａ（　×　ＴＣＣＡＡＧＡ１１１ｃ（Ｘ　Ａ（　ＡＡ（　ＡＴＣＣＣ（　

＊＊　＊＊＊　＊＊＊＊＊＊　＊＊＊＊＊　＊＊＊　＊　＊　＊　＊＊　＊＊　＊＊＊　＊＊　

ＥＣＳ［　１　，ｒＴｃＡ　ＡＣＧＡＧ（　ＣＣＡＡ（；（：（　×了Ｈ　：（　Ａ（　ＣＴＴ（　ＡＣＡＴＧＡＡ（×　气ＡＣＡＣ　

ＥＣＳ［　４　ＴｒｃＡＴＣ（Ｘ　Ｇ（　Ａ（Ｘ）ｃ（　Ａ（　（　Ｔ（）Ｃ（　口　ＡＴ（　ＡＣＡ］ｒ（Ｘ）Ｃ（×ｊＡＣＴＡｃ　

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ＥＣ＆　２２　ｒ　Ｃ　￡Ｇ　ｃｊ　弋　ｉ　吼Ｃ　》Ｃ　Ｇ呶Ｇ　

＊＊＊　＊＊　＊＊＊＊＊　＊　＊＊＊　＊　＊＊　＊　＊＊＊＊＊＊　＊＊　＊　

图２王锦蛇Ｓｏｘ基因ＨＭＧ盒区的ＤＮＡ序列（＊表示一致的核苷酸）　

Ｒｇ２　Ｔｈｅ　ＨＭＧ—ｂｏｘ　ＤＮＡ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆ　Ｓｏｘ　ｇｅｎｅｓ　ｏｆ　Ｅｌａｐｈｅ　ｃａｒｉｎａｔａ（＊ｓｙｍｂｏｌ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ）　

ＶＷＳＲＧＱＲＲＫＭＡＱＥＮＰＫＭＩ－ｈ－ＮＳＥＩＳＫＲＬＧＡＥＷＫＬＬＳＥＡＥＫＲＰＦＩＤＥＡＫＲＬＲＡＬＨＭＫＥ　

ＶＷＳＱＩＥＲＲＫＩＭＥＱＳＰＤＭＨＮＡＥＩＳＫＲＬＧＫＲＷＫＬＬＫＤＳＤＫＩＰＦＩＲＥＡＥＲＬＲＬＭＨＭＡＤＹ　

ＡＥＩＳＫＲＬＧＫＲｗＫＬＬＫＤＳＤＫＩＰＦＩＲＥＡＥＲＩ』　ＬＫ｝　ＡＤＹ　

ＶＷＳＱＮＥＲＲＫＩＭＤＱＷＰＤＭＨＮＡＥＩＳＫＲＩ　ＲＲＷＱＬＬＱＤＳＥＫＩＰＩ　６　ＲＵ　Ｕ（ＨＭＡＤｌＹ　

＊＊＊　＊＊＊　＊　＊＊＊　＊＊＊＊＊＊＊　＊　＊＊　＊　＊＊　＊＊　＊＊＊　＊＊　

图３王锦蛇Ｓ一基因ＨＭＧ盒区氨基酸的编码序列（＊表示一致的氨基酸）　

Ｒｇ３　Ｔｈｅ　ＨＭＧ—ｂｏｘ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆ　Ｓ　ｇｅｎｅｓ　ｏｆ　Ｅｌａｐｈｅ　ｃａｒｉｎａｔａ（　ｓｙｍｂｏｌ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓａｎ１ｅ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ）　

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３１卷第ｌ期　杨超，杨传秀：王锦蛇（Ｅｌａｐｈｅ　ｃａｒｉｎａｔａ）Ｓ［　基因保守区的克隆及测序　

表１王锦蛇Ｓｏｘ基因与其它物种Ｓｏｘ基因ＤＮＡ序列同源性比较　

５５　

Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｈｏｍｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｓｏｘ　ｇｅｎｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｅｌａｐｈｅ　ｃａｒｉｎａｔａ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｓｐｅｃｉｅｓ　

大麻哈鱼　

Ｏｎｃｏｒｈｙｎｃｈｕｓ　

非洲角蟾　

Ｘｅ，ｚｏｐｕｓ　

密西西比鳄　

Ａｌｌｉｇａｔｏｒ　

鸡　

Ｇａｌｌｕｓ　

台湾鼷鼠　

Ｍｕｓ　

人　

Ｈｏｍｏ　

ｍ慷ｉｓｓ　ｌｏｕｉｓ　ｍｉｓｓｉｓｓｉｐｐｉｅｎｓｉｓ　ｇａｌｌｕｓ　ＤｚＨｓｃｕｌｕｓ　ｓａｐｉｅｍ　

３讨论　

３．１王锦蛇Ｓｏｘ基因保守性的探讨　

经与Ｇｅｎｂａｎｋ联机检索，ＤＮＡ序列分析结果显示，王锦蛇ＥＣＳｏｘｌ、ＥＣＳｏｘ４、ＥＣＳｏｘｌ１、ＥＣＳｏｘ２２基因　

与人类相应ｓｏｘ基因的ＤＮＡ序列一致性分别为９１％、９１％、９２％、９１％；与人类相应ＳＯＸ基因编码氨基酸　

的一致性分别为９６％、９８％、９６％、９６％；与其他物种的Ｓｏｘ基因也有很高的相似性（见表１、表２）；这些结果　

显示王锦蛇ＳＯｘ基因与人及其他物种Ｓｏｘ基因不仅在ＤＮＡ序列上而且在其编码的氨基酸序列上都存在高　

度系统进化保守性．ＳＯＸ（Ｓｏｘ）基因的这种高度进化保守性可能反映了其功能上的相似性．　

３．２王锦蛇性别决定机制的探讨　

爬行动物性别决定机制极其复杂，存在有基因型性别决定（ｇｅｎｅｔｉｃ　Ｓｅｘ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ，ＧＳＤ）和环境型性　

别决定（ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｓｅｘ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ，ＥＳＤ）等多种类型，ＥＳＤ中又以温度依赖型性别决定（ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　

ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　Ｓｅｘ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ，ＴＳＤ）为普遍，这在龟鳖目、鳄目以及蜥蜴中均有报道ｌ１　．一般认为，没有性别　

染色体的分化，可能是ＴＳＤ机制的共同特征，也就是说，具ＴＳＤ机制的种类，雌雄间具遗传上的同质性；孵　

化实验表明，某些蛇孵化温、湿度对孵化成功率和幼体性别无显著影响　；迄今，核型分析的结果表明王锦　

蛇染色体数２ｎ＝３６，雌雄间具有性别染色体的分化；第４对大染色体为性染色体（ｚ、ｗ），雌性为ＺＷ型，雄　

性为ｚｚ型［　０　；支持王锦蛇的性别决定为ＧＳＤ机制．本文Ｓｏｘ基因序列分析结果也发现王锦蛇雌雄个体Ｓｏｘ　

基因间确有差异，如ＥＣＳｏｘ４只存在于雌性染色体上，进一步证明了王锦蛇的性别决定为ＧＳＤ机制．然而，　

仅仅基因的克隆和离体表达，并不能代表在生物体中的真实功能［　，在性别决定和分化的特定阶段利用蛋　

白组和日益完善的生物信息系统，将加速对性别决定和分化的认识，这将是我们近一步研究的课题．　

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Ｃｌｏｎｉｎｇ　ａｎｄ　Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｓｏｘ　Ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　Ｅｌａｐｈｅ　Ｃａｒｉｎａｔａ　

ＹＡＮＧ　Ｃｈａｏ　，　

ＹＡＮＧ　Ｃｈｕａｎ—ｘｉｕ２　

（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ａｎｈｕｉ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｈｕ　２４１０００，　

Ｃｈｉｎａ　２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，Ｗａｎｎａｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｗｕｈｕ　２４１００１　

Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ＨＭＧ—ｂｏｘ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ＳＲＹ，３　ｐａｉｒ　ｏｆ　ｄｅｇｅｎｅｒａｔｅ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｓｉｇｎｅｄ　ａｎｄ　

ｕｓｅｄ　ｔｏ　ａｍｐｌｙ　ｔｈｅ　Ｓｏｘ　ｇｅｎｅ　ｏｆ　Ｅｌａｐｈｅ　ｃａｒｉｎａｔａ　ｕｓｉｎｇ　ＰＣＲ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．Ａｎ　ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ　２２０ｂｐ　ＤＮＡ　ｓｅｇｍｅｎｔ　

ｗｅｒｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　ｇｅｎｏｍｅ　ＤＮＡ　ｏｆ　ｍａｌｅ　ａｎｄ　ｆｅｍａｌｅ．Ｔｈｅ　ＰＣＲ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｗｅｒｅ　ｃｌｏｎｅｄ　ｕｓｉｎｇ　ｐＧＥＭ—Ｔ　ｖｅｃｔｏｒ．　

Ｔｈｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｌｏｎｙ　ｗ３ｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ＳＳＣＰ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｗａｓ　ｅｘａｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ａｕｔｏｍａｔｉｃ　ｓｑｅｕｅｎｃｉｎｇ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．　

Ｗｅ　ｇｏｔ　４　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　Ｓｏｘ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　４６０　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｌｏｎｅｓ．ａｍｏｎｇ　ｔｈｅｍ，ｏｎｅ　ｗａｓ　ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　ｏｎｌｙ　ｆｒｏｍ　ｆｅｍａｌｅ　ｂｏｄｙ．　

Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅｒｅ　ａｒｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｍａｌｅ　ａｎｄ　ｆｅｍａｌｅ．Ｔｈｅ　４　Ｓｏｘ　ｇｅｎｅｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｈｉｇｈ　ｈｏｍｏｌｏｇｙ　

ｔｏ　Ｈｕｍａｎ　ＳＯＸ　ｇｅｎｅｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｄｅｎｔｉｔｉｅｓ　ｔｏ　ｈｕｍａｎ　ＳＯＸ１，ＳＯＸ４，ＳＯＸ１１，ＳＯＸ２２　ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＤＮＡ　

ｓｅｑｕｅｎｃｅａｎｄ　ｔｈｅ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ａｒｅ　９１　９１　９２　９１　ａｎｄ　９６　９８　、９６　９６彩÷ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．，ｔ　

ｍｉｇｈｔ　ｂｅ　ｃｏｎｃｌｕｄｅｄ　ｔｈａｔ　Ｓｏｘ　ｇｅｎｅ　ｗａｓ　ｈｉｇｈｌｙ　ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ　ｉｎ　ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ．Ｔｈｅｓｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｐｒｏｖｉｄｅｄ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｄａｔａ　

ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　Ｓｅｘ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　Ｅｌａｐｈｅ　ｃａｒｉｎａｔａ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｅｌａｐｈｅ　ｃａｒｉｎａｔａ；Ｓｏｘ　ｇｅｎｅ；ＰＣＲ；ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ