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2024年6月20日发(作者:异步fifo不是2的n次幂的情况)
固定液
2010-03-15 12:55:52| 分类: 实验小技术|字号 订阅
几种 固定液:
1. F.A.A固定液 又称标准固定液,万能固定液.适用于一般根,茎,叶,花药,子房
组织切片.在植物形态解剖研究上应用极广,此固定液最大优点是兼有保存剂作用,但对
染色体的观察效果较差.
配方:福尔马林(38%甲醛)5 ml: 冰醋酸5ml:70%酒精90 ml
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩;还可加入5 ml甘油(丙三
醇)以防蒸发和材料变硬.
2. F.P.A固定液 配制时用正丙酸代替冰醋酸,三种成分的比例同上液.效果比
F.A.A好.
3. 卡诺氏固定液(Carnoy's Fluid) 适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于
根尖,花药压片及子房石蜡切片等.有极快的渗透力,根尖材料固定15—20min即可,花药
则需1h左右,此液固定最多不超过24h,固定后用95%酒精冲洗至不含冰醋酸为止;如果
材料不马上用,需转入70%酒精中保存.
配方:无水酒精3份:冰醋酸1份
4.鲍因(Bouin)液:苦味酸饱和水溶液(0.9~1.2%)75 mL, 甲醛(37~40%)
25 mL, 冰醋酸 5 mL。
此液一般在临床用时配制,对皮肤及肌腱有软化作用。
5. 4%多聚甲醛固定液
组织细胞中的大多数肽类激素、蛋白物质为水溶性,在进行免疫组织化学和免疫细
胞化学研究之前必需固定。由于肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固
定方法或固定剂的反应也不尽相同。在免疫组织化学和免疫细胞化学研究中,多聚甲醛
(Paraformaldehyde)仍旧是实验室目前最常用的固定剂之一。该固定剂较为温和,能
很好地保存组织的抗原性和细微结构,适于组织标本和细胞片的较长期保存,非常适合
组织和细胞的光镜免疫化学研究。
本产品为4%多聚甲醛的水溶液,广泛地用于免疫组织化学(IHC)和免疫细胞化学
(ICC)实验中的组织和细胞的固定。
保存条件
室温或4℃,密封保存,半年以上。
使用说明
组织块:室温或4℃浸泡固定2-24h,用缓冲液漂洗后即可树酯包埋用于组织切
片。
冰冻切片:室温或4℃10min-2h,视切片厚度而定,用缓冲液漂洗后即可用于
染色。
细胞片:室温或4℃10-30min,用缓冲液漂洗后即可用于染色。
注意事项
1.脱蜡,水化的切片,应避免因切片干燥,而至非特异性染色。
2.本产品不含防腐剂,一经开启稀释,不宜室温或4℃长期保存。
3.热水,高压锅危险,操作时务必谨慎,当心烫伤,沸水浴时间过久易致脱片。
4.使用微波炉修复抗原时,较易引起脱片,请勿使用金属染色架。
2009-08-19 编辑: 【打印】 【关闭】
一、常规固定液的配制
(1) 10%甲醛液
浓甲醛 10ml
蒸馏水 90ml
(2 ) 缓冲中性甲醛液
浓甲醛 10ml
PBS缓冲液(Ph7.2) 90ml
(3 ) 10%中性甲醛液
浓甲醛 10ml
蒸馏水 90ml
碳酸钙 加至饱和
(4 ) Bouin氏固定液
苦味酸饱和水溶液75 ml
甲醛2 ml
冰醋酸5 ml
该固定液中的冰醋酸,对胶原纤维等组织有膨胀作用,而甲醛对组织有收缩作用,
两种试剂的混合使用,用以抵消彼此间的副作用,使组织固定达到优良的固定水平。
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