特异性阻断Shh信号通路对胃癌细胞系SGC-7901增殖和凋亡的影响_

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Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｊ，Ｍａｒ．２００８，Ｖｏｌ　１　７　Ｎｏ．３　

文章编号：１６７１—８６３１（２００８）０３—０１６６—０３　

特异性阻断Ｓｈｈ信号通路对胃癌细胞系ＳＧＣ一７　９０１增殖和凋亡的影响　

李玖池，苏继荣，闰慧明，张志军，卢永清，李文龙，武　伟　

（山西医科大学第二临床医学院，山西太原０３０００１）　

摘要　目的：研究Ｓｏｎｉｃ　Ｈｅｄｇｅｈｏｇ（Ｓｈｈ）信号通路对胃癌细胞系ＳＧＣ　７９０１增殖和凋亡的影响。方法：用四唑蓝　

（ＭＴＴ）比色试验检测Ｓｈｈ信号通路特异性抑制剂ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ对胃癌细胞系ＳＧＣ一７９０１增殖的抑制作用；流式细胞　

术检测细胞增殖指数（ＰＩ）和凋亡指数（ＡＩ）。结果：Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ对ＳＧＣ　７９０１细胞株增殖的抑制作用呈剂量和时间依　

赖性Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ作用后使胃癌细胞周期阻滞在Ｏ０／Ｏ１期，细胞凋亡增加。结论：Ｓｈｈ信号分子对胃癌细胞的增殖起　

维持作用；通过特异性阻断该信号通路，可以抑制胃癌细胞增殖，并促进细胞凋亡。　

关键词　信号通路；胃癌细胞；流式细胞术　

中图分类号：Ｒ７３５．２　文献标识码：Ａ　

Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｓｏｎｉｃ　ｈｅｄｇｄｈｏｇ　ｓｉｇｎａｌ　ｐａｔｈｗａｙ　ｂｌｏｃｋｉｎｇ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎ—　

ｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ　ＳＧＥ一７９０１　

Ｉ．Ｉ　Ｊｉｕ—ｃｈｉ。ＳＵ　ｊｉ—ｒｏｎｇ。ＹＡＮ　Ｈｕｉ　ｍｉｎｇ，ＺＨＡＮ（；Ｚｈｉ—ｊｕｎ。Ｉ　Ｕ　Ｙｏｎｇ—ｑｉｎｇ，Ｉ　Ｉ　Ｗｅｎ—ｌｏｎｇ，ＷＵ　Ｗｅｉ　

（Ｔｈｅ　Ｓｅｃｏｎｄ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｓｈａｎｘｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｃｉｔｙ，Ｔａｉｙｕａｎ　０３０００１．Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｓｏｎｉｃ　ｈｅｄｇｅｈｏｇ　ｓｉｇｎａｌ　ｐａｔｈｗａｙ，ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏ—　

ｓｉｓ　ｏｆ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ　ＳＧＣ一７９０１，Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｕｓｅ　ｔｈｅ　ＭＴＴ　ａｓｓａｙ　ｔｏ　ｅｘａｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ａｎｔｉＤｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｙ—　

ｃｌｏｐａｍｉｎｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ　ＳＧＣ一７９０１．Ｕｓｅ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ（ＦＣＭ）ｔＯ　ｅｘａｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｙ—　

ｃｌｏｐａｍｉｎｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｉｎｄｅｘ（ＰＩ）ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎｄｅｘ（ＡＩ）ｏｆ　ＳＧＣ　７９０１　ｃｅｌｌｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ　ａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ　ｅｆ—　

ｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ａ　ｋｉｎｄ　ｏｆ　ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ　ｏｎ　ｄｏｓｅ　ａｎｄ　ｔｉｍｅ．Ｉｔ　ｃｏｕｌｄ　ｉｎｄｕｃｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｂｌｏｃｋ　ｃｅｌｌ　ｃｙｃｌｅ　ａｔ　

Ｇ０／Ｇ１　ｐｈａｓｅ　ｉｎ　ｔｒｅａｔｉｎｇ　ＳＵＣ一７９０１　ｃｅｌｌｓ　ｗｉｔｈ　ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｓｈｈ　ｓｉｇｎａｌ　ｐａｔｈｗａｙ　ｉｓ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｆｏｒ　ｍａｉｎｔａｉｎｉｎｇ　

ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｂｌｏｃｋｉｎｇ　Ｓｈｈ　ｐａｔｈｗａｙ　ｃａｎ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ａｎｄ　ｐｒｏｍｏｔｅ　ｔｈｅ　

ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　ｓｏｎｉｃ　ｈｅｄｇｅｈｏｇ；ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ；ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ　

Ｓｏｎｉｃ　ｈｅｄｇｅｈｏｇ（Ｓｈｈ）信号通路是在动物胚胎发育过程　

自上海生工生物工程技术服务有限公司。　

中调节细胞间相互作用的重要信号分子之一。Ｓｈｈ信号通路　

１．２实验方法　

的异常激活在越来越多的肿瘤中发现，该信号通路可能在干　

１．２．１细胞培养及处理　

细胞向肿瘤干细胞的转化过程中发挥作用。因此人们对这个　

胃癌细胞系ＳＧＣ一７９０１复苏后，加入含１０￣ｄ＇牛血清的　

信号通路产生了浓厚的兴趣。Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ是Ｓｈｈ信号通路　

ＲＰＭＩ１６４０培养液，置于３７　Ｃ，５　Ｃ（）　，饱和湿度的Ｃ（）　培　

的特异性阻断剂，可抑制Ｓｈｈ信号引起的一系列反应，从而　

养箱中培养。　

抑制Ｓｈｈ信号通路的活性。本实验拟通过ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ特异　１．２．２　ＭＴＴ法检测ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ对ＳＧＣ　７９０１细胞增殖的　

性阻断胃癌细胞系ＳＧＣ一７９０１的信号传递，观察其对胃癌细　

影响　

胞增殖和凋亡的影响，为探讨胃癌的发生机制和治疗提供一　

ＳＧＣ一７９０１胃癌细胞用含１Ｏ　ＢＣＳ的ＲＰＭＩ１６４Ｏ培养　

个依据。　

基常规消化传代培养。待培养瓶中传代细胞融合生长至８０％　

１材料与方法　

左右，ｆ肖化制成１×１０　／ｍＬ细胞悬液，接种于９６孔板，每孔　

１．１材料　２００　ＦＩ　。设置阳性和阴性对照：凋零组（无细胞无血清的ＲＰ—　

细胞系：胃癌细胞（ＳＧＣ一７９０１），购自中科院上海生物细　ＭＩ１６４０培养基）；阴性对照组（有细胞无血清）；阳性对照组　

胞研究所。主要试剂：Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ，购自美国Ｂｉｏｍｏｌ公司；胎　（１Ｏ　血清刺激细胞生长）；此后均为１Ｏ　血清刺激组，再同　

牛血清，购自杭州四季青生物公司；ＲＰＭＩ１６４０培养基，购自　

时依次分别加入不同浓度的ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ（０．６２５，１．２５，２．５，　

美国Ｇｉｂｃｏ公司；四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）、碘化丙啶（ＰＩ），购　５．０　Ｆｍｏｌ／Ｉ　）。分别培养２４，３６，４８，６０　ｈ后，每孔加入ＭＴＴ２０　

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临床医药实践杂志　２００８年３月　！鲞箜　塑　

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Ｌ（浓度５　ｍｇ／ｍＬ）；继续孵育４　ｈ，再加入ＤＭＳＯ显色；最后　

期）（Ｇ。／Ｇ　期＋Ｓ期＋Ｇ　／Ｍ期）×ｌＯＯ％。　

用酶标仪检测各孔吸光度（Ａ值）。每孔设定３个复孔，取其　

１．３统计学处理　

均值。各药物处理组的抑制率一（１一各药物处理组Ａ值阳性　

利用ＳＰＳＳ１２．０统计软件对实验数据进行统计学处理，　

对照组Ａ值）×ｌＯＯ％；实验重复３次。　

计量资料以　±ｓ表示。Ｐ＜０．０５为有统计学意义。　

１．２．３流式细胞术检测细胞增殖指数（ＰＩ）和凋亡指数（ＡＩ）　

２　结　果　

待培养瓶中ＳＧＣ一７９０１传代细胞贴壁生长后，分别加入　

２．１　Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ对ＳＧＣ一７９０１细胞增殖的抑制作用　

１０／￣ｍｏｌ／Ｌ　ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ，阴性对照组加入ｄｄＨ２Ｏ，培养２４　ｈ　

加入不同浓度的ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ后，在相差倒置显微镜下　

后，消化收集各组细胞（５×１０　／ｍＬ），用磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）　

观察胃癌细胞明显皱缩、死亡、细胞密度减少。ＭＴＴ检测发　

洗涤２次（１　０００　ｒ／ｒａｉｎ，离心５　ｍｉｎ），用４　Ｃ预冷的无水乙醇　

现ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ对ＳＧＣ一７９０１细胞株增殖的抑制作用呈剂量　

固定３０　ｍｉｎ后离心弃上清，用ＰＩ染色３０　ｍｉｎ。用美国Ｃｏｕｌ—　

和时间依赖性，在浓度达到０．６２５／ｌｍｏｌ／Ｉ　时即出现抑制细　

ｔｅｒ公司的ＥＬＩＴＥＥＳＰ型流式细胞检测仪检测细胞周期。检　

胞生长的作用，２４　ｈ半数致死量为５．０ｍｏｌ／Ｌ。在一定范围内　

测结果用美国Ｐｈｏｅｎｉｘ公司的Ｍｕｈｉｃｙｃｌｅ软件进行分析。ＡＩ　

随着剂量的增高和作用时间的延长，对胃癌细胞增殖的抑制　

＝

亚二倍峰细胞数／总细胞数×１（）（）　；ＰＩ一（Ｓ期＋Ｇ　／Ｍ　

作用越明显（见表１）。　

表ｉ　不同剂量Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｏｎｅ对ＳＧＣ一７９０１细胞增殖的影响　±Ｓ　

２．２　Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ对ＳＧＣ一７９０１细胞周期和凋亡的影响　

识。。］。因此Ｓｈｈ信号途径可能在促使干细胞向肿瘤干细胞的　

Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ使胃癌细胞周期阻滞在Ｇ。／６　期，细胞凋　

转化过程中具有重大意义。有研究证明Ｓｈｈ信号通路的活化　

亡增加。ＡＩ和ＰＩ值计算见表２。　

可引起表皮干细胞的恶性转化　］，在黑色素瘤及乳腺癌、卵　

表２　Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｏｎｅ对ＳＧＣ一７９０１细胞凋亡和增殖的影响　±　

巢癌、直肠癌、胰腺癌、人口腔鳞状细胞癌组织中同样检测到　

Ｓｈｈ的表达。根据Ｂｅｒｍａｎ等　报道，在来源于食管、胃、胆　

道、胰腺和结肠肿瘤的３８个细胞系中有３７个检测到Ｓｈｈｍ—　

ＲＮＡ的表达，而且Ｓｈｈ可以维持肿瘤细胞的生长和增殖。　

随着Ｓｈｈ信号通路的异常激活在越来越多的肿瘤中发　

３讨　论　

现，研究Ｓｈｈ信号通路与肿瘤发生以及增殖的关系逐渐变为　

胃癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一，流行病学调查表　

热点。因此如能证实Ｓｈｈ信号通路是维持肿瘤干细胞自我更　

明，世界胃癌发病率在男性恶性肿瘤中仅次于肺癌，占第二　

新的信号传导机制，即可通过阻断该信号通路，从而从根源　

位，在女性恶性肿瘤中居第四位。我国胃癌在各种恶性肿瘤　

上治疗胃癌，避免其他不必要的治疗及相关毒副反应。Ｃｙ—　

中居首位，年平均病死率为２５．５３／ｌＯ万。因而胃癌的治疗就　

ｃｌｏｐａｍｉｎｅ是一种植物性甾体类生物碱，可能特异性阻断　

显得尤为重要。　

Ｓｈｈ信号通路。研究证实ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ主要是通过对抗Ｓｍｏ　

Ｓｈｈ信号通路在胚胎发育中起着重要作用，控制着细胞　而抑制Ｓｈｈ信号通路。本实验通过特异性阻断Ｓｈｈ信号通路　

的命运与增殖ｎ］。近几年人们发现许多疾病都与Ｓｈｈ信号通　

对胃癌细胞系ＳＧＣ一７９０１增殖的影响来研究其与胃癌细胞增　

路有关，当Ｓｈｈ信号通路异常激活时，会引起肿瘤的发生与　殖以及凋亡的关系，从而为胃癌的治疗提供临床指导。实验　

发展。因此“控制脊椎动物胚胎发育的信号通路可能与人类　

中通过不同剂量和时间的ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ处理，发现ｃｙ—　

肿瘤发生有关”＿２］的观点已逐步为国内外学者所接受。Ｓｈｈ　

ｃｌｏｐａｍｉｎｅ对ＳＧＣ一７９０１细胞株增殖的抑制作用呈剂量和时　

信号通路在多种器官的成体干细胞的维持和自我更新中也　

间依赖性；在浓度达到０．６２５￣ｔｍｏｌ／Ｉ　时出现对细胞的生长　

发挥作用，而其中许多分子已被作为癌基因或抑癌基因所认　

抑制作用，在一定范围内随着剂量的增高和作用时间的延　

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Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｊ，Ｍａｒ．２００８，Ｖｏｌ　１７　Ｎｏ．３　

长，这种抑制作用逐渐增强。Ｃｙｄｏｐａｍｉｎｅ可使胃癌细胞周期　

阻滞在Ｇ。期，并能提高细胞凋亡的发生率。实验表明：Ｓｈｈ　

信号通路对胃癌细胞的增殖起维持作用，通过特异性阻断该　

［３］　

ｃａｎｃｅｒ　Ｃｅｌｌ，２００３，４（４）：２４５　２４７．　

Ｒｕｉｚｉｚ　Ａｈａｂａ　Ａ，Ｓａｎｃｈｅｚ　Ｐ．Ｄａｈｍａｎｅ　Ｎ．Ｇ¨ａｎｄ　

ｈｅｄｇｅｈｏｇ　ｉｎｃａｎｃｅｒ：ｔｕｍｏｕｒｓ，ｅｍｂｒｙｏｓ　ａｎｄ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　

＿Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ　Ｒｅｖ　Ｃａｎｃｅｒ，２００２，２（４）：３６１－３７２．　

信号通路，可以抑制胃癌细胞的增殖，并促进细胞凋亡。而　

ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ是Ｓｈｈ信号的特异性阻断剂，可抑制信号通路　

的活性，但它不是全身性化疗药，对机体其他部位不会产生　

副作用ｌ６］。从而为探讨胃癌的发生机制和治疗方案提供了新　

的方向。　

［４］　

Ｇｒａｃｈｔｃｈｏｕｋ　Ｖ．Ｇｒａｃｈｔｃｈｏｕｋ　Ｍ．Ｌｏｗｅ　Ｉ　．ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　

ｍａｇｎｉｔｕｄｅ　ｏｆ　ｈｅｄｇｅｈｏｇ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｄｅｆｉｎｅｓ　ｓｋｉｎ　

ｔｕｍｏｒ　ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ［Ｊ］．ＥＭＢ（），２００３，２２（１１）：２　７４１－２　

７５１．　

［５］　

Ｂｅｒｍａｎ　Ｄ　Ｍ，Ｋａｒｈａｄｋａｒ　Ｓ　Ｓ．Ｍａｉｔｒａ　Ａ．Ｗｉｄｅ　ｓｐｒｅａｄ　

ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ　ｆｏｒ　ｈｅｄｇｅｈｏｇ　ｌｉｇａｎｄ　ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　

参考文献：　

ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅｔｒａｅｔ　ｔｕｍｏｕｒ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２００３，　

［１］Ｔｏｆｔｇａｒｄ　Ｒ．Ｈｅｄｇｅｈｏｇ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｉｎ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ　

４２５（７０２１）：７４６　８５１．　

Ｍｏｌ】Ｉｆｅ　Ｓｃｊ。２０００．５７（】２）：】７２Ｏ】７３】．　

［６］　

Ｔａｉｐａｌｅ　Ｊ，Ｃｈｅｎ　Ｊ　Ｋ，Ｃｏｏｐｅｒ　Ｍ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｉ—　

［２］　Ｘｉｅ　Ｋ，Ａｂｂｕｚｚｅｓｅ　Ｊ　Ｉ　．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　ｂｉｏｌｏｇｙ　ｉｎ　

ｕｃｏｇｅｎｉｃｍｕｔａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ａｍｏ　ｔｈｅｎｅｄ　ａｎｄ　ｐａｔｃｈｅｄ　ｃａｎ　ｂｅ　

ｆｏｒｍｓ　ｃａｎｃｅｒ：ｔｈｅ　ｅｍｅｒｇｉｎｇ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｅｄｇｅｄｏｇ　ｓｉｇ　

ｒｅｖｅｒｓｅｄ　ｂｙ　ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２０００，４０６（６）９９：　

ｎａｌｉｎｇ　ｐａｔｙｗａｙ　ｉｎｕｐｐｅｒ　ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｋａｎｃｅｒｓ［Ｊ］．　

１　００５—１　００９．　收稿日期：２００７—１２—１７　

作者简介：李玖池（１９８１一），男，山西省朔州市人，在读硕士．主要从事胃肠道肿瘤工作。　

文章编号：１６７１—８６３１（２００８）Ｏ３一Ｏ１６８一Ｏ４　

前列地尔对原代培养神经元类缺血再灌注　

损伤后线粒体解耦联蛋白４表达的影响　

王丽荣，刘瑞珍　

（山西医科大学第二临床医学院，山西太原０３０００１）　

摘要　目的：探讨线粒体解耦联蛋白４（ＵＣＰ４）在原代培养神经元类缺血再灌注损伤后不同时间点的表达变化及　

前列地尔对其影响。方法：以原代培养神经元为研究对象，建立类缺血再灌注损伤模型，应用免疫细胞化学方法观察　

类缺血再灌注后３　ｈ，６　ｈ，１２　ｈ时ＵＣＰ４的表达变化。实验组为在缺血期及再灌期均给予０．Ｏ１　ｍｇ／ｍＩ　前列地尔，观察　

前列地尔对ＵＣＰ４表达的影响。结果：ＵＣＰ４阳性细胞随类缺血再灌注时间的延长，阳性神经元胞浆的灰阶值数值变　

大，染色变浅，反映神经细胞内ＵＣＰ４蛋白表达量减少。在再灌注３　ｈ时ＵＣＰ４的表达即降低；再灌注６　ｈ时ＵＣＰ４的　

表达明显降低，再灌注１２　ｈ时其表达仍在下降。在再灌注后３　ｈ，６　ｈ，１２　ｈ组与正常对照组比较。差异具有显著性意义　

（Ｐ＜Ｏ．０５），实验组ＵＣＰ４阳性细胞胞浆的灰阶值在再灌注后３　ｈ，６　ｈ。１２　ｈ时均低于类缺血再灌注模型组，差异有显　

著性（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论：ＵＣＰ４在类缺血再灌注后不同时间点的表达呈动态变化，提示ＵＣＰ４可能参与了脑缺血再灌注　

损伤的病理过程；而前列地尔可上调ＵＣＰ４的表达，从而发挥保护神经细胞的作用。　

关键词　类缺血再灌注；原代培养神经元；前列地尔　

中图分类号：Ｒ３　文献标识码：Ａ　

Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ａｌｐｒｏｓｔａｄｉｌ　ｏｎ　ＵＣＰ４　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｒａｔ　ｓ　ｎｅｕｒｏｎｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｉｓ—　

ｃｈｅｍｉａ－ｌｉｋｅ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　

ＷＡＮ（；－Ｌｉ　ｒｏｎｇ，ＬＩＵ　Ｒｕｉ—ｚｈｅｎ　

（Ｔｈｅ　Ｓｅｃｏｎｄ　Ｈｏｓｐｉｔａ１　ｏｆ　Ｓｈａｎｘｉ　Ｍｅｄｉｃａ１　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｙｕａｎ　０３０００１，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓ　ｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＵＣＰ４　ｉｎ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｒａｔ　ｓ　ｃｏｒｔｉｃａｌ　ｎｅｕｒｏｎｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｉｓ—　

ｃｈｅｍｉａ一１ｉｋｅ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｌｐｒｏｓｔａｄｉｌ　ｏｎ　ｉｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｉｓｃｈｅｍｉａ—ｌｉｋｅ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｗａｓ　ｍａｄｅ　ｏｎ　ｐｒｉｍａ—　

ｒｙ　ｃｕＩｔｕｒｅｄ　ｒａｔ　ｓ　ｎｅｕｒｏｎｓ．Ｉｍｍｕｎｏｈ　ｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＵＣＰ４　ａｆｔｅｒ　ｒｅｐｅｒ—　

ｆｕｓｉｏｎ　ａｔ　３　ｈ，６　ｈ，１２　ｈ．Ａｌｐｒｏｓｔａｄｉｌ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｇｉｖｅｎ　０．０１　ｍｇ／ｍＩ　Ａｌｐｐｒｏｓｔａｄｉｌ　ｄｕｒｉｎｇ　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ａｎｄ　ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ．Ｔｈｅ　

ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＵＣＰ４　ｗａｓ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ　ｉｎ　Ａｌｐｒｏｓｔａｄｉｌ　ｇｒｏｕｐ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｏｎｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｉｍｅ　ｉｎ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　

ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ，ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　ｇｒａｙ—ｓｃａｌｅｓ　ｏｆ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｎｅｕｒｏｎｓ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ｔｈｅ　ｃｏｌｏｕｒ　ｌｉｇｈｔｅｄ，ｔｈｉｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　

ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｅｘＤｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＵＣＰ４　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＵＣＰ４　ｗａｓ　ｒｅｄｕｃｅｄ　３　ｈ　ａｆｔｅｒ　ｉｓｃｈｅｍｉａ—ｌｉｋｅ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ａｎｄ　

ｗａｓ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　６　ｈ　ａｆｔｅｒ　ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ，ｉｔ　ｓｔｉｌｌ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　１　２　ｈ　ａｆｔｅｒ　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｌｉｋｅ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ