admin 管理员组文章数量: 1086019
2024年12月29日发(作者：织梦小说采集)
MagMAX 预分装病毒 RNA/DNA 提取试剂盒说明书
产品名称
MagMAX™预分装病毒RNA/DNA提取试剂盒
包装规格
包装规格：预分装2
×
96次反应/盒
货号：A52990
预期用途
用于核酸提取和纯化步骤。本试剂盒仅供科研使用(包括动物和环
境用途)。
提取产物类型
病毒核酸(RNA和DNA)
检验原理
采用磁珠法核酸分离技术，携带正电荷的磁珠易于吸附负电荷的
核酸，主要用于从样本中提取DNA和RNA。将液体样本与结合缓
冲液、蛋白酶K和磁珠混合。核酸与磁珠结合后，经过数次洗涤与
磁场捕获，洗脱下来的核酸即可通过PCR或其它特定方法来检测
特定的RNA或DNA。磁分离法是广泛应用于动物健康等行业且能
实现高通量、自动化的核酸提取方法。
主要组成成分
序号试剂盒组成规格主要成分
1
MagMAX™预分装
预装板96次硫氰酸胍(41-50%) 、
病毒结合缓冲液反应
×2
板丙烯酰胺(<0.001%)
2
MagMAX™预分装
预装板96次硫氰酸胍(18-24%) 、
病毒洗涤缓冲液 I反应
×2
板丙烯酰胺(<0.001%)
3
MagMAX™预分装
预装板96次
病毒洗涤缓冲液 II反应
×2
板
乙醇(70-100%)
4
MagMAX™预分装
预装板96次聚山梨酯-20 (0.01-0.2%)、
病毒洗脱缓冲液反应
×2
板三羟甲基氨基甲烷(2%-5%)
5
MagMAX™预分装
预装板96次
RNA/DNA结合磁珠
反应
×2
板
磁性微球(<0.2%)
6
MagMAX™病毒
RNA/DNA蛋白酶K
1.2 mL×1瓶
丙三醇(甘油) (40-70%)、
蛋白酶K (4-7%)
7
KingFisher™ 96
深孔板磁套
2块
储存条件及有效期
试剂于15
°
C - 30
°
C储存。生产日期及使用期限见试剂盒外包装。
适用仪器
适用于生命科技公司(Life Technologies)生产的KingFisher™ Flex
全自动核酸提取仪(货号：A5400630、C5400630)。
样本要求
适用样本类型：全血、血清、血浆、口腔液、组织/器官、环境拭子
等样本。
样本采集：按照各样本类型常规采集方法进行采集。
样本保存和运输：采集后的样本可立即用于核酸提取，或2
°
C-
8
°
C保存(不超过24小时)，长期保存应置于-20
°
C以下，避免反复冻
融。样本运送可采用加冰密封进行运输。
检验方法
1. 需自备的仪器、试剂、耗材
名称品牌货号
KingFisher™ Flex Thermo Fisher A5400630
全自动核酸提取仪
ScientificC5400630
一次性封膜
Thermo Fisher
Scientific
4306311
Fisher Scientific™ Thermo Fisher
Bead Mill 24珠磨均质仪Scientific
15-340-163PM
PYREX™实心玻璃珠
(3 mm)
Fisher Scientific11-312-10A
PBS缓冲液
Thermo Fisher
Scientific
AM9625或1001002
VetMAX™ Xeno™ Thermo Fisher
A29761、A29762或在
内部阳性对照
Scientific
VetMAX™ qPCR检测
试剂中提供
微量管离心机
96孔板离心机
涡旋振荡器
P1000多通道移液器
通用
P10移液器
P100/P200移液器
2. 制备样本
应通过上下颠倒或涡旋方式混合样本，以确保样本在使用前混匀。
2.1. 全血：取100 µL样本用于提取。
2.2. 血清或血浆：取200 µL样本用于提取。
2.3. 口腔液：
2.3.1. 在1.5 mL离心管中加入500 µL样本。
2.3.2. 以15000 x g离心2分钟。
2.3.3. 取100 µL离心后的上清液用于提取。
2.4 组织/器官：
2.4.1. 在2 mL离心管中加入20-30 mg的样本。
2.4.2. 向离心管中加入1 mL PBS。
2.4.3. 向离心管中加入2个实心玻璃珠(3 mm)。
2.4.4. 使用Fisher Scientific Bead Mill 24珠磨均质仪以6 m/s
的速度珠磨样本45秒。
2.4.5. 以15000 x g离心2分钟。
2.4.6. 取200 µL离心后的上清液用于提取。
2.5 环境拭子：
2.5.1. 向2 mL离心管中加入1 mL PBS。
2.5.2. 将折断的拭子头放入离心管中。
2.5.3. 涡旋3分钟。
2.5.4. 以15000 x g离心2分钟。
2.5.5. 取100 µL离心后的上清液用于提取。
3. 正确设置仪器
3.1. 确保正确安装KingFisher™ Flex仪器与相应的96深孔磁头、
加热模块。
3.2. 确保已下载好相应的程序(MagMAX_Viral_RNA_DNA_
Prefilled)并已载入至仪器中。
4. 制备蛋白酶K/IPC混合物
4.1. 请参照相应的VetMAX™ qPCR检测试剂使用说明书，以确
定每份样本所需的内部阳性对照(IPC)的试剂量。如果检测试剂
未使用IPC，则跳过步骤4并直接进入步骤5。
4.2. 制备足量的蛋白酶K和IPC的混合物。例如，如果检测试剂
使用说明书要求向每个提取反应中加入4 µL的IPC，则在1.5 mL
离心管中混合550 µL蛋白酶K (每个提取反应5 µL，加上富余部
分)和440 µL IPC。
4.3. 涡旋蛋白酶K/IPC混合物至充分混合并短暂离心以将液体收
集到管底。
5. 制作样本板
5.1 撕去预分装结合缓冲液深孔板的封膜，向其每个孔中加入蛋
白酶K/IPC混合物(在步骤4制备)。例如，如果不需要IPC，则只
加入5 µL蛋白酶K。如果使用4 µL IPC，则加入9 µL混合物。
5.2向预分装结合缓冲液深孔板每个孔加入样本。(样本量如步骤
2所示)。
6. 核酸提取及洗脱
6.1 选择仪器中的MagMAX_Vrial_RNA_DNA_Prefilled程序。
6.2 点击开始，撕去各预分装深孔板的封膜，同时将磁棒套放入
洗涤缓冲液II板中，然后根据仪器提示，将各板放置于相应的板
位。
下表为放置后的各96孔板参考位置顺序：
孔板
96 孔板
位置
所包含的试剂/
编号
耗材
体积/孔
蛋白酶 K：5 μL
结合缓冲液板1
蛋白酶K/样本/
IPC：参照使用说明书
结合缓冲液样本：100-200 μL
结合缓冲液：265 μL
结合磁珠预装板2
结合磁珠/磁珠：10 μL
缓冲液缓冲液：190 μL
洗涤缓冲液I预装板3洗涤缓冲液I洗涤缓冲液 I：500 μL
洗涤缓冲液II预装板4
洗涤缓冲液II/
磁棒套
洗涤缓冲液 II：500 μL
洗脱缓冲液预装板5洗脱缓冲液洗脱缓冲液：65 μL
2.3.3 在程序运行完之后(约25分钟)，立刻取出洗脱液板，提取
完成。
注意：为了防止蒸发，尽快将洗脱液板里的上清液转移到无核酸酶的板
或者管中，立刻用于下一步实验。或者用一张新封膜封好洗脱液板，放
入-80°C冰箱保存。所有使用完毕的深孔板用封膜封好丢弃。
检验方法的局限性
本产品不能单独使用，需与KingFisher™ Flex全自动核酸提取仪
配套使用。
产品性能指标
提取效率：用试剂盒提取已知浓度的参考品，其核酸提取物通过
PCR得到的Ct平均值与相应浓度的对照标准品Ct值误差不超过
±
2。
注意事项
1) 本产品仅供科研使用(包括动物和环境用途)。使用前请仔细阅
读本说明书，并严格按照要求进行操作。所有步骤如非特殊
注明，均应在室温进行。
2) 试剂盒涉及的待提取样本应视为具有传染性，实验室所有操
作应符合《病原微生物实验室生物安全通用准则》；所有废
弃物处理必须按照当地法律法规进行处置。
3) 操作过程中应特别注意防止RNase对 RNA的降解作用。所用
离心管和枪头请使用RNase-free产品，纯化后产品尽快使用。
4) 溶液含蛋白变性剂，具有腐蚀性，请小心操作。若不慎溅到
皮肤，请用大量水冲洗。
5) 试剂盒中所提供的孔板均为一次性产品，请勿重复利用。
6) 当试剂温度过低时可能会造成试剂粘稠甚至产生些许沉淀。
如果有沉淀，可以在37
°
C环境下(如水浴锅)放置片刻使沉淀完
全溶解。轻轻摇动可加速沉淀溶解，但需要注意摇动时避免
产生气泡。
7) 储存和使用时，均需确保96孔板正面朝上放置。撕去各板封
膜之前需注意是否有液体、磁珠吸附于封膜上。如有必要，
请通过瞬时离心确保试剂位于96孔板底部，以避免试剂损失。
基本信息
生产企业名称：赛默飞世尔科技(广州)有限公司
住所：广州市黄埔区南云五路11号研发中心C栋501房
邮编：510145
联系方式：800-820-8982
售后服务单位名称：英潍捷基(上海)贸易有限公司
网址：/cn/zh/
技术支持热线：400-820-8982
生产地址：广州市黄埔区南云五路11号研发中心C栋501房
仅供科研使用(包括动物和环境用途)
2022
版权声明：本文标题：MagMAX预分装病毒RNA DNA提取试剂盒说明书 内容由网友自发贡献，该文观点仅代表作者本人， 转载请联系作者并注明出处：http://roclinux.cn/p/1735495664a1672324.html， 本站仅提供信息存储空间服务，不拥有所有权，不承担相关法律责任。如发现本站有涉嫌抄袭侵权/违法违规的内容，一经查实，本站将立刻删除。
发表评论