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2024年6月20日发(作者：游戏机为什么叫switch)
天津天士力集团研究院药理所 文件编号：
核酸染色
世上物质万种，名目繁多，但不管是动物还是生物，都含有核酸，它是生物在发育，繁殖，
遗传和变异的主要物质，因而它成为人们的主要研究对象，在病理学的范畴中，主要是在形态学
方面对核酸的显示。
核酸分为脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid, DNA）和核糖核酸（ribonucleic acid, RNA）两大
类。在正常的情况下，其含量约占细胞干重的5-15%，约90%的DNA存在于细胞浆中，而少量
的DNA（约10%）存在于细胞核中，RNA主要存在于细胞核中。当肿瘤生长活跃时，用于显示
核中的物质就增多，染色增强。
一、DNA和RNA的简单结构
组成DNA分子的脱氧核糖酸主要有四种，即dAMP、dGMP、dCMP和dTMP，它有三个级别的
结构即一级、二级和三级。
一级结构是由四种脱氧核糖核苷酸通过3,′-5′磷酸二酯键被此连接而成的线状或环状大分子，没
有侧链。
二级结构是双螺旋结构，以一共同轴为中心，以一条5′-3′，另一条为3′-5′相反向，但互相平行的
脱氧核糖苷酸链组成（即所称的麻花结构）.
三级结构是指双螺旋链作进一步的扭曲构象。
组成RNA的四种碱基分别是：腺嘌呤，鸟嘌呤，胞嘧啶和胸腺嘧啶。
核酸受许多条件的制约，如温度、酸碱性试剂等。
最常导致核酸变化的是核酸的变性，当温度升高至50℃以上时，DNA的双螺旋结构即被破坏，
氢键断裂，原来的两条结构链被彼此分开，涉及此种情况的是免疫组化染色方法时的前期处理，
如抗原修复，微波辐射技术，水溶锅或者高压锅的抗原修复等，都涉及至双链的变化（见抗原修
复法）。本文只谈核酸的形态学的显示。
二、Feulgen显示DNA法
1．切片应用硅化玻片裱片后烘烤2h。
2．切片脱蜡至水。
3．用5NHCL于20℃处理切片40分钟。
4．直接进入Schiff试剂作用60分钟左右。
5．0.5%偏重亚硫酸钠洗3次，1-2分钟/次。
6．流水冲洗5-10分钟。
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天津天士力集团研究院药理所 文件编号：
7．脱水、透明，中性树胶封固。
结果：DNA呈鲜红色或紫红色。
注意事项：
1．该法也可应用1NHCL水解切片，但液体需预热至60℃。
2．临用时配制5NHCL，在加入HCL时，液体温度可升高，这样可减少切片水解的作用时间。
3．水解所用的1NHCL和5NHCL两种，根据实验证明，5NHCL比，1NHCL效果较好。
4．显示完DNA后，也可用淡绿等衬染背景，使背景呈现为绿色。
5．组织块固定可用甲醛配成的固定液如中性缓冲福尔马林液，Carnoy氏液，Helly氏液等固定，
但不能用Bouin液固定，固用它固定会引起组织的过度水解。
三、核仁组成区和酸性粘多糖复合显示法
（Combining method for Argyrophilic proteins of the nucleolar organizer regions and acid musin）
（1）试剂的配制：
①2%的甲酸和2%的明胶各一份，加入50%的硝酸银2份，测PH值约2-2.5。
②取0.5g阿申蓝（8GX）溶于3%的醋酸溶液中100ml，PH2.5。
（2）操作步骤：
①切片脱蜡至水，浸入蒸馏水中。
②浸入胶性银液中在暗室室温中染30-40
③蒸馏水彻底冲洗
④滴阿申蓝液于切片上于室温染色30分钟。
⑤水洗。
⑥常规脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：核仁组成区（AgNOR）显示大小不一的黑色颗粒；酸性粘多糖呈现；深浅不一的蓝绿色。
四、粘多糖和核仁组成区双染法（Double staining for cabohydrate and ANOR）
（1）试剂配制：
a)Schiff氏试剂见前。
b)胶性银液见前。
（2）操作方法：
①切片脱蜡至水；
②蒸馏水浸泡；
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